液相溶剂效应也有积极作用?了解一下溶剂聚焦


在之前的文章中跟大家谈到过,在做液相分析时,如果你用来溶解样品的溶剂初始梯度条件的流动相的强度差异比较大,比如使用100%乙腈溶解的样品,但是初始梯度条件的流动相只有10%的乙腈的时候,就容易出现峰前伸、拖尾、分裂的问题。


这就是我们常说的液相的溶剂效应。(前文链接:死体积越大,怎么出峰越好呢?!



那如果我用的溶剂洗脱能力比初始流动相弱的话,会出现什么样的情况呢?

我们今天就一起来看看。

 

首先回顾一下样品进入色谱柱的过程。我们想要分析的样品,在经过一系列的前处理、稀释、定容以后,被转移到进样小瓶里面。自动进样器将一定体积的样品(比如20微升),注入到液相系统中。


我们这里说的样品,实际上是我们想要分析的样品分子以及用来溶解稀释样品分子的溶剂


随后,样品被流动相推动着,走过进样器和色谱柱之间的管路,进入色谱柱。


样品溶剂被流动相带走,而样品分子则在色谱柱内的固定相和流动相之间进行着不停的吸附和解吸附,最后跑出色谱柱进入检测器并被检测到,形成色谱峰。

 

我们举个例子。

如果你是用的液相方法是初始条件是30%的乙腈水的流动相,而样品是用10%乙腈水溶解的。



样品进入液相系统后,很快来到色谱柱的柱头,随即样品便在固定相和流动相中开始了分配,而样品溶剂被流动相带走。



我们来比较一下处于不同位置的ABC三个样品分子的情况。分子A一开始在色谱柱中的运动,就是在30%的流动相条件下的。



而分子B和C在一开始的运动,其实是在溶剂做流动相的条件下,也就是10%乙腈水的情况进行的。这时候,C的运动速度最慢,B次之,而A最快。



这样在溶剂被流动相带走的过程中,样品分子在色谱柱头的分布变得更加紧密了,这就叫做溶剂聚焦


跟上期提到的溶剂效应相反,它能够让色谱出峰更加尖锐、柱效更高


所以我们可以看到,当我们要追求液相分析的灵敏度时,选取合适的样品溶剂,利用溶剂聚焦,可以让我们能够进更大体积的样品,而最大可能地减小对峰型的影响。


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